聊聊普析紫外分光光度計的測量誤差來源

　　1.參比溶液和溶劑的選擇

　　分光光度計的測量實際上是以通過參比池的光強度作為入射光強度來測定試樣的吸光度，先調節儀器使透過參比池溶液的吸光度為零，然后讓同一束光通過樣品，使得吸光度比較真實地反映待測物質的濃度，所以參比溶液的選擇非常重要。如果僅有待測物質與顯色劑的反應產物有吸收，可用溶劑或蒸餾水作參比溶液。如果顯色劑有顏色，并在測定波長下有吸收，則用顯色劑溶液作參比溶液，所加入顯色劑及其它試劑的量，與試樣中的加入量應一致。如果樣品中其它組分本身的顏色對測定有干擾，而所用顯色劑沒顏色，則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。

　　2.測試波長的選擇

　　當用普析紫外分光光度計對溶液進行測定時，先需要選擇合適的測量波長。選擇的依據是該被測溶液的吸收曲線。在一般情況下，我們總是選擇大吸收波長作為測量波長，這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下大吸收峰很尖銳、吸收過大或附近有干擾存在，就不能選大吸收波長，而必須在保證有一定靈敏度的情況下，選擇吸收曲線中的其它波長進行測定，以消除干擾。繪制吸收曲線是正確選擇波長的有效手段和方法。

　　3.吸光度范圍的選擇

　　試樣在不同吸光度時，濃度的相對誤差不同，一般選擇0.2-0.8之間，濃度相對誤差較小，可以通過改變吸收池厚度、檢測波長或待測溶液濃度，使吸光度讀數在適宜范圍內。

　　4.狹縫寬度的選擇

　　狹縫寬度不僅影響光譜的度，也影響吸光度值，在定量分析時，為了得到足夠的測量信號，應采用較大狹縫。在定性分析時，為了提高分辨率，應采用較小狹縫，以獲得精細的光譜結構。

　　5.吸收池的選擇和使用

　　吸收池的規格應根據被測溶液顏色深淺來確定，一般是被測溶液顏色深時選光程短的，顏色淺時選光程長的，同一實驗使用同一規格同一套吸收池。在定量測量之前需要對吸收池作校正和配對工作，吸收池不匹配時，對測量產生誤差，吸收池方向不同，透光率亦有差異，使用時應注意方向。比色皿毛玻璃一面的上端有一個箭頭，應與光路保持一致。另外，使用時，不要把溶液注得太滿，以防在推動比色皿架時溶液溢出皿外。如透光壁外有溶液存在，要擦干再測，否則將產生誤差。

　　6.溫度的選定

　　溫度對溶液顏色的深淺和吸光度都有影響，溫度升高，紫外一可見光譜吸收向短波方向移動。故在繪制標準曲線和測定樣品時，應保持溫度一致，通常在室溫條件下進行。

　　由于普析紫外分光光度計引起的測量總誤差除來自儀器自身性能、測量條件外，還來自于分析過程的各個步驟，如試樣處理、分離富集等，可能由于化學操作引起待測組分的損失和雜質的引入。所以出現不可接受的測量誤差時要從多方面分析。